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      茯苓菌種的制備及菌絲的定性鑒別,菌絲的TLC檢視

      [導讀]種前處理:接種室、潔凈工作臺打掃干凈, 潔凈工作臺用75%的酒精棉球擦拭消毒, 將接種工具和滅過菌的培養基放在SW-CJ-2FD潔凈工作臺上, 開啟紫外燈滅菌1h。接種時將茯苓菌核沖洗干凈, 用紗布擦干水分, 移到接種室, 用酒精棉球進行表面消毒, 用解剖刀把菌核切開, 在潔凈工作臺上用鑷子挑取中間菌核置培養基上。將培養基放于27℃培養箱中培養并觀察是否有雜菌感染

      菌絲的TLC檢視;稱取茯苓粉末 (本實驗室采于安徽省金寨縣桃嶺鄉桐崗村) 1g, 茯苓菌絲0.5g, 加乙醚50m L, 超聲處理30min, 濾過, 濾液蒸干, 殘渣加甲醇1m L使溶解。另取茯苓酸 (上海中藥標準化研究中心, 批號:09-1016) 0.2011g, 加1m L甲醇溶解, 為對照品溶液。照薄層色譜法試驗, 吸取上述4種溶液分別點于同一硅膠G薄層板上, 以甲苯-乙酸乙酯-甲酸 (20∶5∶0.5) 為展開劑, 展開, 取出, 晾干, 噴以2%香草醛硫酸溶液-乙醇 (4∶1) 混合溶液, 在105℃加熱至斑點顯色清晰。菌絲在色譜中, 在與茯苓藥材色譜相應的位置上, 顯相同顏色的主斑點, 且在茯苓酸斑點處有相同的斑點

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